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脈動(dòng)真空滅菌滅菌效果驗(yàn)證

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2023-09-04 08:40【

備注說明 :下面滅菌效果驗(yàn)證中使用的 3 種無菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基分別按各自培養(yǎng)基的使用說明配制并分裝在 6 分管中,每支分裝 6mL~8mL,蓋上膠塞經(jīng) 116℃,1800s 高壓滅菌后無菌檢驗(yàn)合格備用。

 

方法一 :無菌(純粹)檢驗(yàn)法

檢驗(yàn)過程:將高壓滅菌后的 MEM 溶液(在室溫放置 24h,然后移至層流罩(局百環(huán)境)下用 5mL 無菌注射器取樣,并分別接種硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 2 支、胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基1 支和酪胨瓊脂培養(yǎng)基 2 支,每支接種 0.2mL,分別在 25℃(硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基和酪胨瓊脂培養(yǎng)基各一支)和 37℃(硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和酪胨瓊脂培養(yǎng)基各一支)條件下培養(yǎng) 7 天,每天觀察并記錄檢驗(yàn)結(jié)果。檢驗(yàn)結(jié)果 :觀察 7 天,無菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基中均無菌落生長,無菌檢驗(yàn)合格。

 

方法二 :細(xì)胞培養(yǎng)檢驗(yàn)法

檢驗(yàn)過程:在高壓滅菌后的 MEM 溶液中加 10% 胎牛血清后貼壁培養(yǎng) MDBK 細(xì)胞,并 37℃培養(yǎng) 3 天,每天觀察細(xì)胞是否染菌。檢驗(yàn)結(jié)果:3 天后細(xì)胞生長良好,顯微鏡鏡檢細(xì)胞輪廓清晰,視野干凈,未見雜菌。

 

方法三 :生物指示劑驗(yàn)證法

在高壓滅菌 MEM 溶液時(shí)選擇 3 個(gè)溫度可能最低的點(diǎn)分別放置生物指示劑 , 常用的生物指示劑嗜熱脂肪芽孢桿菌Bacillusstereathernophilus,其常規(guī)微生物耐熱參數(shù) D 值為 121℃(1.5min~3.0min)。一同滅菌,滅菌結(jié)束后將滅菌后的生物指示劑及時(shí)取出并置于 56℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48h,隨后取出培養(yǎng)后的生物指示劑,觀察安瓿的內(nèi)容物顏色,并與生物指示劑照片進(jìn)行比較觀察。檢驗(yàn)結(jié)果 :48h 培養(yǎng)后的生物指示劑顏色呈紫紅色且澄清,說明該滅菌過程可有效殺滅孢子菌。

 

驗(yàn)證結(jié)果重復(fù)上述驗(yàn)證,連續(xù)三次,結(jié)果均符合要求。


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